广州瑞丰实验设备有限公司作者
厌氧培养箱的使用方法需严格遵循操作流程,以确保厌氧环境的稳定性和实验安全。以下是综合多个来源的操作指南 (注意:由于用户要求不使用特定表述,此处省略“根据搜索结果”类引导语,直接整合关键步骤并标注来源):
? 一、前期准备
设备检查
确保箱体密封性良好,气路无泄漏;
检查催化剂(钯粒)活性,必要时更换或再生(160℃烘烤2小时);
准备混合气体(N? 85%、H? 10%、CO? 5%)并调整输出压力至0.1MPa。
清洁消毒
用紫外线灯灭菌操作室30分钟,放置干燥剂(500g)和厌氧指示剂(如美兰试纸);
手套、培养皿等配件需预先灭菌。
?? 二、厌氧环境建立
氮气置换氧气
关闭取样室内外门,抽真空至≥66kPa;
充入氮气至常压,重复抽真空-充氮循环3次,清除氧气。
混合气体置换
输入混合气体(流量10ml/min),重复置换2-3次;
启动钯催化剂除氧,1小时后观察美兰指示剂不变色(证明氧浓度≤0.1%)。
? 三、样品操作与培养
样品传递
关闭缓冲舱内门,开启外门放入样品;
关闭外门后,对缓冲舱重复抽真空-充混合气3次,再开启内门转移样品至操作室。
培养设置
设置温度(通常35–37℃)及湿度(45–60%);
通过手套口操作,避免长时间敞开破坏厌氧环境。
?? 四、运行维护与终止
日常监控
每日检查美兰指示剂颜色,异常时重新置换气体;
维持混合气补入(10ml/min)抵消微量氧渗透。
结束操作
关闭电源气阀,清洁箱体并消毒;
每周更换干燥剂与钯催化剂。
?? 关键注意事项
风险环节 | 操作规范 |
气体安全 | 氢气环境严禁明火,定期检测气路防泄漏16;更换气瓶时扎紧气管防氧气进入。 |
断电应急 | 突发断电需立即关闭气阀,操作室可维持厌氧10小时,超时需转移样品。 |
密封性维护 | 每月检查门封圈老化情况,校准温控系统。 |
? 操作提示:长期运行时,需通过缓冲舱传递耗材,避免频繁开启主操作室12;微需氧菌培养可调整混合气比例(如N? 90%、H? 5%、CO? 5%)。
此流程整合了设备初始化、环境构建及安全维护的核心步骤,严格遵循可确保厌氧菌培养的有效性。
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